維生素AElisa試劑盒使用需要留意的事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù)：517 更新時(shí)間：2023-02-13
維生素AElisa試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA法定量測定其他血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中維生素A(VA)ELISA試劑盒含量。實(shí)驗(yàn)原理：將維生素A(VA)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的維生素A(VA)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入生物*化的維生素A(VA)抗體，將未結(jié)合的生物*化抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記的親和素，再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，井在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的維生素A(VA)呈正相關(guān)。
維生素AElisa試劑盒使用注意事項(xiàng)：
1.試劑準(zhǔn)備:準(zhǔn)備一次實(shí)驗(yàn)所需要的酶標(biāo)條，其它的可從微孔板上拆下，密封，按照說明書要求保存，以備下次使用。
2.加樣:實(shí)驗(yàn)操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。加樣時(shí)注意不要有氣泡，將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。加樣或加試劑時(shí)，個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時(shí)間，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。因此，一次加樣時(shí)間好控制在十分鐘內(nèi)。
3.溫育:為防止樣品蒸發(fā)，實(shí)驗(yàn)時(shí)請將加上蓋或覆膜的酶標(biāo)板置于濕盒內(nèi)，以避免液體蒸發(fā)，洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài)，同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的溫育時(shí)間和溫度。
4.洗滌: 充分的洗滌非常重要，在每次洗滌過程中，都要將洗滌液甩干。洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響*后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
5.反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
6. 底物:底物請避光保存，在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光自接照射。
7.如果實(shí)驗(yàn)室內(nèi)濕度低于60%，推薦使用加濕器提高濕度水平。
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